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EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,其連有的炔烴團在天然化合物中很少見,能夠在DNA復制時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在合成的DNA分子中。基于Apollo? 熒光染料與EdU的特異性反應,即可直接并準確地檢測出DNA復制活性。EdU廣泛應用于細胞增殖、分化、生長與發育、DNA損傷修復、病毒復制等方面的研究,尤其適合siRNA、miRNA、小分子化合物及藥物的細胞增殖篩選實驗。銳博生物具有EdU試劑盒的專利,擁有自主知識產權。【一種標記活細胞內核酸的方法和試劑盒? ?專利授權號:CA201010183211.5】

產品優勢

1、簡單:無需抗原抗體反應,基于小分子化學反應的檢測方法簡單高效,反應僅需要幾分鐘
2、靈敏:無需抗體,檢測染料僅BrdU抗體的1/500,很容易擴散,即便是單個增殖細胞也能準確檢測
3、快速:無需過夜,省卻了抗原抗體反應的復雜繁瑣步驟,完成整個檢測周期僅需5小時
4、準確:無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細胞核邊緣清晰完整
5、兼容:對樣品幾乎無損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時標記,能夠同時檢測細胞其他性狀特征
6、多種染料可選,適用于各種動物細胞檢測,對植物細胞亦適用

選擇指南
多種染料可選

銳博生物EdU產品提供多種染料類型,覆蓋多個檢測通道,方便您輕松選擇適合的染料,最大限度地擴展第三方染色的適用范圍,最大限度地適合您的檢測儀器要求,幫助解決您的實驗難題。

三種染料激發光譜和發射光譜(虛線:激發光譜;實線:發射光譜)
注:Apollo染色的化學反應會使GFP,EGFP,R-PE失活,請選購該類產品時注意。

技術支持

采用3種染料分別檢測50uM EdU孵育2h的HeLa細胞(40X),采用高內涵篩選平臺(BD pathway 855)檢測,其中Apollo?643染料檢測結果為灰度值,本圖片用紅色渲染。

簡單:無需抗原抗體反應,基于小分子化學反應的檢測方法簡單高效,反應僅需要幾分鐘;

圖1 BrdU與EduU檢測方法原理示意圖

表1 BrdU與EdU檢測方法優點分析

靈敏:無需抗體,檢測染料僅BrdU抗體的1/500,很容易擴散,即便是單個增殖細胞也能準確檢測;

A549細胞系孵育30分鐘的細胞增殖情況

Hela細胞系孵育1小時的細胞增殖情況

3T3細胞孵育6小時的細胞增殖情況

快速:無需過夜,省卻了抗原抗體反應的復雜繁瑣步驟,完成整個檢測周期僅需2.5小時;

10X

20X

40X圖7 A549細胞系孵育2小時后的細胞增殖檢測(10X,20X,40X)

準確:無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細胞核邊緣清晰完整;

40X

圖8 BrdU需要DNA變性后才能與抗體結合,導致BrdU、Hoechst染色彌散,邊緣模糊不清;而EdU邊緣清晰完整,檢測更靈敏、更準確

兼容:對樣品幾乎無損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時標記,能夠同時檢測細胞其他性狀特征。

EdU細胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好保護細胞形態、DNA整體結構以及細胞內抗原識別位點,更適合結合其他染料或蛋白標記(如P65抗體)等進行多重標記,在細胞水平直接獲取細胞多維特征信息,更適合深入開展細胞功能方面的研究。

結合P65抗體和EdU,分析藥物對細胞增殖及NF-KB信號通路的影響

適用于各種動物細胞檢測,對植物細胞亦適用:

EdU增殖檢測方法對各種細胞系均適用,簡單、靈敏、快速、準確

植物細胞的細胞壁比較厚,對植物起著保護的作用,采用抗體檢測方法通常需要消化細胞壁,且容易帶來一些雜質干擾,甚至破環細胞形態,導致檢測的可靠性降低。EdU和Apollo?染料分子均很小,能夠輕易地透過細胞壁屏障,無需消化細胞壁,無需DNA變性及抗原抗體反應,即可準確地檢測植物生長,發育,分化等性狀。

應用EdU檢測植物細胞生長分化(Kotogány E, et al. Plant Methods. 2010)

參考文獻

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[2] Shan K, Liu C, Liu B H, et al. Circular noncoding RNA HIPK3 mediates retinal vascular dysfunction in diabetes mellitus[J]. Circulation, 2017, 136(17): 1629-1642. (IF:23.054 銳博產品:EdU細胞增值檢測試劑盒 研究領域:糖尿病 南京醫科大學)
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[4] Fu G B, Huang W J, Zeng M, et al. Expansion and differentiation of human hepatocyte-derived liver progenitor-like cells and their use for the study of hepatotropic pathogens[J]. Cell research, 2019, 29(1): 8. (IF:17.848 銳博產品:EdU細胞增值檢測試劑盒 研究領域:肝臟疾病 第二軍醫大學)
[5] Huang Z, Zhao J, Deng W, et al. Identification of a cellularly active SIRT6 allosteric activator[J]. Nature chemical biology, 2018, 14(12): 1118. (IF:12.154 銳博產品:EdU細胞增值檢測試劑盒 研究領域:肝細胞癌 上海交通大學醫學院)

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產品編號 產品名稱 目錄價數量操作
C00003 試劑A EdU溶液, 1000X,20uL ¥800.00
C00052-1 試劑A EdU 粉末, 2mg ¥2,580.00
C10310-1 Cell-Light EdU Apollo567 In Vitro Kit(100T ) ¥1,500.00
C10310-2 Cell-Light EdU Apollo643 In Vitro Kit(100T ) ¥1,500.00
C10310-3 Cell-Light EdU Apollo488 In Vitro Kit(100T ) ¥1,500.00
C10338-1 Cell-Light EdU Apollo567 In Vitro Flow Cytometry Kit(20T ) ¥1,500.00
C10338-2 Cell-Light EdU Apollo643 In Vitro Flow Cytometry Kit(20T ) ¥1,500.00
C10338-3 Cell-Light EdU Apollo488 In Vitro Flow Cytometry Kit(20T ) ¥1,500.00
C00052 EdU 2mg ¥2,580.00
C00053 EdU 10mg ¥3,880.00
C00054 EdU 50mg ¥5,180.00

 

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